1) recombinant Pichia pastoris
重组甲醇营养型毕赤酵母
1.
The characteristics of recombinant Pichia pastoris fermentation process that produces HSA-IL2 in a 5 L fermentor were explored.
分析了重组甲醇营养型毕赤酵母在5L多参数自控发酵罐上生产人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白(HSA-IL-2)的发酵过程。
2) Recombinant
重组
1.
Study on fermentation process of fusion protein of recombinant salmon calcitonin expressing E.coli;
重组鲑鱼降钙素融合蛋白工程菌发酵工艺研究
2.
Optimizing expression conditions of recombinant human placental anticoagulant protein derivative expressing Escherichia coli strain;
重组人胎盘抗凝蛋白变体基因工程表达菌的表达条件优化研究
3.
Antitumor effect of recombinant oncolytic adenovirus Ad-CD80-TPE-GM in Hep2 xenograft tumor model;
重组溶瘤腺病毒Ad-CD80-TPE-GM对Hep2细胞移植瘤的杀伤效应
3) reorganization
重组
1.
Reorganization of Gold Nanoparticles in Self-Assembled Nanostructures;
金纳米粒子组装结构中的表面重组现象
2.
Discussion on the Reorganization and System Transformation of Petrochemical Sales Enterprises;
谈石化销售企业的重组改制与脱困
3.
The resources plan balance method and decision model of Universities State-owned asset reorganization;
高校国有资产重组的资源规划平衡方法和决策模型
4) recombination
重组
1.
Recombination among human immunodeficiency virus type 1 quasispecies;
人免疫缺陷病毒1型CRF07-BC毒株准种间的重组
2.
Implementation and analysis on processes recombination of products based on BPR ideology;
基于BPR思想产品流程重组的实施分析
5) reconstruction
重组
1.
Research on the utilization of transglutaminase in the reconstruction of smashed shrimp;
谷氨酰胺转胺酶在碎小虾仁重组大虾仁工艺中的应用
2.
The reconstruction of library s functions under network environment;
网络环境下图书馆的机构重组
3.
On Transfer and Reconstruction of Properity Rights in the Reform of SOEs;
试论国企改革中的产权流动与重组
6) restructuring
重组
1.
Propping,Restructuring and ST Corporations Way to “Uncap”;
支持、重组与ST公司的“摘帽”之路
2.
Study on the Restructuring Models of Non-performing Assets of Assets Management Company in China;
中国金融资产管理公司不良资产重组模式研究
3.
Provincial Tax Authorities Restructuring Research Based on Large Departments System Reform;
大部门体制改革背景下的我国省域税务机关重组问题研究
参考词条
补充资料：甲醇酵母表达系统
甲醇酵母基因表达系统是一种最近发展迅速的外源蛋白质生产系统。甲醇酵母是可利用甲醇作为唯一碳源的酵母，主要有h.polymorpha、candida bodinii、pichia pastoris三种，其中pichia pastoris作为基因表达系统使用得最多、最广泛［1］。与以往的基因表达系统相比，它具有无可匹敌的高表达特性，已被认为是最具有发展前景的生产蛋白质的工具之一。
1. 外源蛋白质的基因在甲醇酵母中的高效表达
目前已有多种蛋白质的基因在该表达系统中克隆成功，包括蛋白酶、酶抑制剂、受体、单链抗体等(表1)。尽管各种外源蛋白质产生的水平不一，但各种蛋白质在甲醇酵母中的产生水平均为在细菌、昆虫或哺乳动物等表达系统中产量的10～100倍［2］。如表皮生长因子(egf)在酿酒酵母中的产量为7.4mg/l，而在甲醇酵母中为450mg/l，提高了60倍［3］。椐报道，外源蛋白质在甲醇酵母中的产量最高可达12g/l［9］。
2. 实现外源蛋白质高效产生的关键因素
2.1 表达载体 首先，甲醇酵母中没有稳定的质粒，所以其表达载体采用整合型质粒。利用醇氧化酶(甲醇代谢的关键酶)基因-1(aox1)的启动子(paox1)和转录终止子(3′aox1)构建成整合型表达载体。paox1是一个极强的启动子，醇氧化酶的产量最高可占甲醇酵母中可溶性蛋白质的30%［2］，所以能使外源蛋白质在它的控制下高效产生。其次，在载体中加入酿酒酵母的分泌信号和前导肽序列(α因子)构建分泌型载体，一方面可以减轻宿主细胞的代谢负荷，另一方面可以减少宿主细胞蛋白水解酶对外源蛋白质的降解，ppic9k、pmetαa、b、c均为此类载体。此外，使多拷贝目的基因整合入甲醇酵母染色体，形成多个表达单元，产生高产的菌株，此类载体有pao815、ppic3.5、ppic9等。
2.2 受体菌 在以葡萄糖或甘油为碳源的培养基上生长时，甲醇酵母中aox1基因的表达受到抑制，而在以甲醇为唯一碳源时，诱导基因表达，使外源蛋白质的产量更高。甲醇酵母适合高密度连续培养的条件，细胞干重达100g/l以上，蛋白质产量极高［14］。受体菌采用蛋白水解酶缺陷型，从而大大降低产物的降解。常用的甲醇酵母受体菌有gs115、km71、pmad11、pmad16等。
3. 应用前景
经过近几年的发展完善，甲醇酵母表达系统已日趋成熟，应用也日趋广泛。国内已有多篇在甲醇酵母中生产外源蛋白质成功的报道(表2)。美国invitrogen公司也已开发出多种新型的甲醇酵母表达系统试剂盒，如multi-copy pichia expression kit、easyselect pichia expression kit、pichia methanolia expression system等，利用甲醇酵母表达系统克隆一个外源基因已十分方便。相信随着对甲醇酵母研究的进一步深入，它在生产外源蛋白质方面将日益展示出诱人的前景。
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