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1)  Cleavage sites of Vp4
Vp4胰酶切割位点
2)  Trypsin cleavage site
胰酶切割位点
3)  cleavage site
切割位点
4)  β site APP cleaving enzyme 1
β-位点APP切割酶1
1.
At 72h later,cells were examined for β-secretase activity by fluorescence method with a kit supplied by R&D Systems,and were examined for amyloid precursor protein(APP) and β site APP cleaving enzyme 1(BACE1) protein expressions by Western blot and for mRNAs with RT-PCR.
lL-1)AST处理,荧光法测定β-分泌酶活力,并用Western blot和RT-PCR技术检测淀粉样前体蛋白(APP)和β-位点APP切割酶1(BACE1)的表达。
5)  endonuclease site
酶切位点
1.
Within the pBC174,there is a cryptic microsatellite( AC) 13 at the 1 511 position,and 57 restriction endonuclease sites of 20 endonucleases exist in this sequence.
序列中含有 2 0种限制性内切酶的 5 7个酶切位点 ,97个不同的正向重复序列 ,其中 71个 8bp、10个 9bp、10个 10bp、2个 11bp和 4个 17bp。
6)  PvuⅡ site
Pvu酶切位点
补充资料:胰酶
【通用名称】
胰酶
【其他名称】
胰酶 胰酶 拼音名:Yimei 英文名:Pancreatin 书页号:2000年版二部-735 本品系自猪、羊或牛胰中提取的多种酶的混合物,主要为胰蛋白酶、胰淀粉酶与胰 脂肪酶。按干燥品计算,每1g中含胰蛋白酶不得少于600 活力单位,胰淀粉酶不得少于 7000活力单位,胰脂肪酶不得少于4000活力单位。必要时可用乳糖、蔗糖或低倍胰酶稀 释。
【性状】
本品为类白色或微带黄色的粉末;微臭,但无霉败的臭气;有引湿性; 水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。
【检查】
脂肪 取本品1g,置具塞锥形瓶中,加乙醚10ml,密塞,时时旋动,放 置约2 小时后,将乙醚液倾泻至用乙醚湿润的滤纸上,滤过,残渣用乙醚10ml照上法处 理,再用乙醚5ml 洗涤残渣,合并滤液及洗液至一恒重的蒸发皿中,使乙醚自然挥散后, 在105 ℃干燥2 小时,精密称定,遗留脂肪不得过20mg。 干燥失重 取本品,在105 ℃干燥4 小时,减失重量不得过5.0 %(附录Ⅷ L)。
【效价测定】
胰蛋白酶 对照品溶液的制备 取已在 105℃干燥至恒重的酪氨酸, 精密称定,加0.2mol/L盐酸溶液溶解并稀释成每1ml 中约含50μg 的溶液。 供试品原液的制备 取本品约0.1g,精密称定,置乳钵中,加冷至5 ℃以下的氯化 钙溶液(取氯化钙1.47g ,加水500ml 使溶解,用0.1mol/L盐酸溶液或0.1mol/L氢氧化 钠溶液调节pH值至6.0 ~6.2)少量,研磨均匀,置100ml 量瓶中,加氯化钙溶液至刻度, 摇匀;精密量取10ml置50ml量瓶中,加入冷至5 ℃以下的硼酸盐缓冲液(取硼砂2.85g 、 硼酸10.5g 与氯化钠2.50g ,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.5 ±0.1)至刻度,摇 匀。每1ml 中含胰蛋白酶约0.12活力单位。 测定法 取试管3 支,分别精密量取供试品原液1ml 与上述硼酸盐缓冲液2ml ,在 40℃水浴中保温10分钟,分别精密加入在40℃水浴中预热的酪蛋白溶液〔取酪蛋白对照 品1.5g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液13ml与水40ml,在60℃水浴中加热使溶解,放冷,加 水稀释至100ml ,调节pH值至8.0 )5ml,摇匀,立即置40℃±0.5 ℃水浴中准确反应30 分钟,再各精密加入5 %三氯醋酸溶液5ml 终止反应,混匀,滤过,取续滤液作供试品 溶液;另精密量取供试品原液1ml ,加上述硼酸盐缓冲液2.0ml, 在40℃水浴中保温10 分钟,精密加5 %三氯醋酸溶液5ml ,摇匀,置40℃±0.5 ℃水浴中准确反应30分钟,立 即精密加入酪蛋白溶液5ml ,摇匀,滤过,取续滤液作空白对照;照分光光度法(附录 Ⅳ A),在275nm 的波长处,测定并计算供试品溶液吸收度的平均值(A)。另用0.2mo l/L盐酸溶液作空白对照,在275nm 的波长处测定对照品溶液的吸收度(As)。按下式 计算: A Ws 13 n 每1g含胰蛋白酶活力(单位)=──×──────×───×─── As 181.19 30 W 式中 Ws 为对照品溶液每1ml 中含酪氨酸的量,μg; W为供试品取样量,g; n为供试品的稀释倍数500。 在上述条件下,每分钟水解酪蛋白生成三氯醋酸不沉淀物(肽及氨基酸等)在 275 nm波长处与 1μmol酪氨酸相当的酶量,为1活力单位。 供试品测得的A值应在0.15~0.6 ,否则应调整浓度,另行测定。 胰淀粉酶 供试品溶液的制备 取本品约0.3g,精密称定,置研钵中,加冷至 5 ℃以下的磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾13.61g与磷酸氢二钠35.80g, 加水使溶解成 1000ml,调节pH值至6.8 )少量,研磨均匀,置200ml 量瓶中,加上述磷酸盐缓冲液至刻 度,摇匀。每1ml 中含胰淀粉酶10~20活力单位。 测定法 量取1%马钤薯淀粉溶液(取经105 ℃干燥2 小时的马铃薯淀粉1.0g, 加水10ml,搅匀后,边搅拌边缓缓倾入100ml 沸水中,继续煮沸20分钟,放冷,加水稀 释至100ml )25ml、上述磷酸盐缓冲液10ml、1.2 %氯化钠溶液1ml 与水20ml,置 250ml 碘瓶中,在40℃水浴中保温10分钟,精密加入供试品溶液1ml ,摇匀,立即置40 ℃±0.5℃水浴中准确反应10分钟,加1mol/L盐酸溶液2ml 终止反应,摇匀,放至室温后 ,精密加碘滴定液(0.1mol/L)10ml,边振摇边滴加0.1mol/L氢氧化钠溶液45ml,在暗处放置 20分钟,加硫酸溶液(1→4)4ml ,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定至无色。另量取 1 %马铃薯淀粉溶液25ml、上述磷酸盐缓冲液10ml、1.2 %氯化钠溶液1ml 与水20ml, 置碘瓶中,在40℃±0.5℃水浴中保温10分钟,放至室温后,加1mol/L盐酸溶液2ml, 摇匀,加入供试品溶液1.0ml ,摇匀,精密加入碘滴定液(0.1mol/L)10ml,边振摇边滴 加0.1mol/L氢氧化钠溶液45ml,在暗处放置20分钟,加硫酸溶液(1→4)4ml ,用硫 代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定至无色,作为空白对照,按下式计算。每1ml 碘滴定液 (0.1mol/L)相当于9.008mg 无水葡萄糖。 (B-A)F 9.008 ×1000 n 每1g含胰淀粉酶活力(单位)=───×───────×─── 10 180.16 W 式中 A 为供试品消耗硫代硫酸钠滴定液的容积,ml; B 为空白消耗硫代硫酸钠滴定液的容积,ml; F 为硫代硫酸钠滴定液的浓度(mol/L) 换算值; W 为供试品取样量,g; n 为供试品稀释倍数(200) 。 在上述条件下,每分钟水解淀粉生成1μmol 葡萄糖的酶量,为1 活力单位。 (B-A) 的硫代酸钠滴定液应为2.0 ~4.0ml ,否则应调整浓度,另行测定。 胰脂肪酶 供试品溶液的制备 取本品约0.1g,精密称定,置乳钵中,加冷至5 ℃ 以下的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液〔取三羟甲基氨基甲烷606mg,加0.1mol/L盐酸溶 液45.7ml,加水至100ml,摇匀,调节pH值至7.1 〕少量,研磨均匀,置50ml量瓶中,加上 述缓冲液至刻度,摇匀。每1ml 中含胰脂肪酶8 ~16活力单位。 测定法 量取橄榄油乳液(取橄榄油4ml 与阿拉伯胶7.5g,研磨均匀,缓缓加水研 磨使成100ml ,用高速组织捣碎机以每分钟8000转搅拌两次,每次3 分钟,取乳剂在显 微镜下检查,90%乳粒的直径应在 3μm 以下,并不得有超过10μm 的乳粒)25ml、8% 牛胆盐溶液2ml与水10ml,置100ml烧杯中,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)调节pH值至9.0, 在37℃±0.1℃水浴中保温10分钟,再调节pH值至9.0,精密量取供试品溶液1ml,在37℃± 0.1℃水浴中准确反应10分钟,同时用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定使反应液的pH值恒定在 9.0,记录消耗氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)的量(ml)。另取在水浴中煮沸15~30分钟的上 述供试品溶液1ml,照上述方法测定作空白对照,按下式计算。 (A-B)M×1000 n 每1g含有胰脂肪酶活力(单位)=──────×── 10 W 式中 A为供试品消耗氢氧化钠滴定液的容积,ml; B为空白消耗氢氧化钠滴定液的容积,ml; M为氢氧化钠滴定液的浓度,mol/L; W为供试品取样量,g; n为供试品稀释倍数(50)。 在上述条件下,每分钟水解脂肪(橄榄油)生成1μmol脂肪酸的酶量,为1活力单位。 平均每分钟消耗的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)的量应为0.08~0.16ml,否则应调整 浓度,另行测定。
【类别】
助消化药。
【贮藏】
遮光,密封,在干燥处保存。
【制剂】
(1)胰酶肠溶片 (2)胰酶肠溶胶囊
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参考词条