1) Staggered extention process
交替延伸PCR
2) Overlap Extension PCR
交错延伸PCR
3) Splicing by overlap extension by PCR (SOE by PCR)
交错延伸剪接PCR
4) Overlap extension PCR
重叠延伸PCR
1.
1 as the template,the PSD-95 mutant genes were amplified by overlap extension PCR,and then were cloned into the plasmids of PSD-95-pcDNA3.
1为模板,采用重叠延伸PCR法获得突变型PSD-95的局部或全长cDNA片段,并克隆至PSD-95-pcDNA3。
2.
According to the amino acids sequence of OC-IΔD86 gene and Escherichia coli codon usage, we synthesized this gene by overlap extension PCR method with 7 oligonucleotides DNA fragments.
根据OC-IΔD86基因序列,设计合成了7条寡核苷酸片段,通过重叠延伸PCR技术合成了OC-IΔD86基因,利用设计好的BamH I/Xho I酶切位点将OC-IΔD86基因克隆到原核表达载体pet21b中,在1mmol/L的IPTG诱导后5h,OC-I?D86融合基因在大肠杆菌中得到表达,表达产物处于可溶状态,其表达量占总蛋白的11。
3.
How to create two separate site-specific mutagenesis in a DNA fragment using overlap extension PCR was explored.
探讨如何利用重叠延伸PCR对同一靶DNA片段中的两个不同位点实施联合突变。
5) overlapping extension PCR
重叠延伸PCR
1.
Cell culture-adaptive mutations were carried out by the method of overlapping extension PCR OE-PCR at the sites of E1202G T1280I and S2197P in the genes of ns3 and ns5a.
方法:根据HCV全长基因组cDNA序列及突变位点设计引物,运用重叠延伸PCR法对ns3和ns5a基因的E1202G、T1280I和S2197P位点进行细胞培养适应性突变,将突变后的片段分别克隆入pBluescriptIIKS(+)、pRSET-A载体,经测序正确后,分别连入含有HCV全长cDNA的质粒的H/FL相应位置,置换原未突变片段,并进行PCR及酶切鉴定。
6) overlap extention PCR
重叠延伸PCR
1.
K88ac-STⅡ fused gene amplified by overlap extention PCR was cloned into T vector.
利用重叠延伸PCR技术将K88ac STⅡ融合基因克隆于T载体上,将重组基因质粒转化到受体菌DH10B中,蓝白斑筛选阳性菌落,通过PCR、NcoI/XcoI酶切后测序,与genbank报道的K88ac结构基因序列进行比对,证明所克隆的目的片段为K88ac STII融合基因。
补充资料：多肽链延伸因子
多肽链延伸因子
多肽链延伸因子 polypeptide chain elonga－tion factor
蛋白质生物合成中参与多肽链延伸过程的蛋白质因子。从大肠杆菌等原核细胞可纯化获得三种延伸因子（elongation factor），即eftu，efts和efg，分子量大约分别为4.7万，3.6万和8.3万。eftu与gtp结合成eftu-gtp，然后再与氨酰trna结合，形成三复合体（ternary complex）氨酰-trna-eftu－gtp。这种三复合体与核糖体的氨酰trna部位（a部位，aminoacyl site）结合，继而gtp被分解，eftu以eftu－gtp的形式从核糖体上游离出来。游离的eftu－gdp与efts反应，再生成eftu－ts，然后与gtp结合成eftu－gtp。另一方面结合在p部位（peptide transfer）。多肽链即可延长一个氨基酸残基。接着肽基trna从a部位转移（translccation）到p部位，p部位的trna从核糖体上脱离下来。该反应由efg（g因子，亦称为移位酶）催化，再将一分子的gtp水解。如图所示，由于上述反应的逐次反复进行，而使多肽链延伸反应得以进行，每延长一个氨基酸残基，就水解两分子gtp。动物细胞或其他真核细胞基本上也以同样机制进行多肽链的延伸，并且也分离到了对应于原核细胞的各因子。
说明：补充资料仅用于学习参考，请勿用于其它任何用途。