补充资料：麻痹病

麻痹病
paralysis

加而增加。病毒主要积累在蜜蜂头部。特别是舌腺及脂肪体细胞的细胞质内。瓦螨与这种病毒的关系密切，它可以刺破成年蜂的体壁，将病毒剌入血淋巴，在体内复制，导致蜜蜂死亡。在夏季，蜂团温度在35℃下，积累的病毒量比在30℃下多3倍以上，而慢性麻痹病毒在30℃下增殖却比在35℃下快。 缓慢性麻痹病病毒(Slow paralysis virus．简称SPV)为等轴二十面体球型病毒，直径为30纳米(图4)．沉降系数为176 S。在氯化铯中的浮密度为1．37克／毫升，蛋白质分子量为2．7×10‘、2．9×10‘和4．6×1D3．与上述3种麻痹病毒无血清学关系，病毒注射成年蜜蜂体后12天左右死亡，死亡前一两天。前两对足出现典型麻痹症状：图4 缓慢性麻痹病病毒(×3．5×10s)诊断方法主要诊断方法有： 症状诊断息慢性麻痹病的蜜蜂通常有两种症状．即腹部膨大型和黑蜂型。春季出现的多为腹部膨大型，行动迟缓。身体颤抖。失去飞翔能力；秋季出现的多为黑蜂型。头尾发黑．身体瘦小，颤抖。由于受健康蜂的驱逐和拖咬。病蜂多集中在巢脾框梁上、蜂箱底部和巢脾的边缘处。患急性麻痹病的蜜蜂无明显症状表现．但死亡异常迅速。 电子显微镜诊断取一定数量的病蜂，按每只蜂体加1毫升O．0lM、pH 6．7的磷酸缓冲液研磨、捣碎，再加1／10体积的乙醚和四氯化碳继续乳化，经差速离心或密度梯度离心，然后将纯化的病毒液用2％的磷钨酸或醋酸双氧铀负染，置电镜下观察，若发现大量长短不一的椭圆形病毒粒子．则为慢性麻痹病病毒。若发现大量均一的球型病毒粒子，则为急性麻痹病病毒。 血清学诊断常用的有琼脂免疫双扩散法、对流免疫电泳法、酶联免疫吸附法和双抗体夹心诊断法。在采用这些方法前，首先应制备样品和抗体。取病蜂15210只置研钵内研磨，加7毫升O．01 M、pH 6．7的磷酸缓冲液和1．．5毫升的DIECA及1．5毫升乙醚．制备悬浮液，以4000转／分的转速离心5分钟。上清液作检验用。抗体的制备是将纯化的病毒液免疫家兔．制备免疫抗体血清，可用于一般血清学诊断，如作酶联免疫吸附诊断则需进一步纯化抗体血清，获得免疫球蛋白IgG，并用酶标记后应用。三种血清学诊断法的具体操作程序分别为：①琼脂免疫双扩散诊断法。抗原和抗体在同一凝胶内彼此扩散，两者相遇后形成特异的沉淀线。将精制的琼脂粉用0．05M、pH8．6的巴比妥缓冲液配制成1．5％浓度．也可用蒸馏水或生理盐水配制。凝胶打孔为梅花型，孔径为4毫米．孔距5毫米，中间孔加麻痹病病毒抗血清．周围孔加待检测的样品，置3712并保持一定湿度。自然扩散24小时，如出现明显的沉淀线即为阳性。无沉淀线出现为阴性。

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