补充资料：植物种质离体保存技术

植物种质离体保存技术
in vitro conservation of plant germplasm

Zhiwu zhongzhiljti booeunjishu植物种质离体保存技术(in vitro eonservation of plantgerllll〕lasm)在离体条件下保持植物物种，使之在任何时候都具有生命力，并在保存后仍然能稳定地保持其遗传性状的技术。植物种质保存方式有原地保存、易地保存和离体保存。植物种质离体保存的意义在于:①长期保藏无病原的茎尖分生组织以及稀有珍贵的植物组织，便于进行国际间交换。②离体保存的各类种质资源的遗传多样性，是植物育种和作物改良的基础。③离体保存植物种质所占空间小，维持较简单和经济。④避免了田间条件下存在的遗传侵蚀问题。⑤保存无性繁殖的植物种质，繁殖潜力大。⑥克服组织培养和细胞培养过程中不断的继代培养会引起染色体和基因型的变异和在培养中发生的选择性遗传变异，保持组培物细胞全能性、含有特殊产物的细胞系和抗逆性的细胞系等。⑦防止植物种质衰老。⑧提高细胞的抗寒性。 植物种质的离体冰冻保存，可长期保存生命物质，使其处于恒定状态。冰冻程序是:将组织培养物预处理(继代)选择处于旺盛的对数分裂期的培养细胞，因其具有丰富稠密的细胞质未液泡化而抗冻力强，加人冰冻保护剂，如二甲亚矾(DMSO)，然后进行冷冻处理，贮于一1%℃(液氮中)。冷冻方法有3种:①快速冷冻法。将培养物放人瓶中投人液氮罐中，温度下降速度为50~120℃/分，甚至更快。细胞含水量少的样品适合此法。②分步冷冻法。适合于细胞悬浮培养物，选用慢速度使温度下降至一20~一40℃，放置一段时间，再用快速冷冻法降至一196℃。③慢速冷冻法。将待保存的样品瓶先在控制降温的装置(如有计算机编译系统的冷冻机，杜氏瓶等)内冷冻，温度下降速度为一0.1~一10℃/分，这对细胞脱水有利，能使细胞间冻结的水分减至最少。当温度降至一30~一40℃或一100℃时，平衡一段时间，再放人液氮罐保存。当需要贮存的植物种质时，要经过解冻处理，进行再培养，最后进行生活力和再生力的鉴定。 植物种质离体保存技术分长期保存和短中期保存。它包括:①干燥贮存法。首先对培养材料进行预处理，提高培养基中糖浓度，改变细胞中水分结构或间接增加细胞中干物质含量。采用此法保存胡萝卜愈伤组织已获成功。②低温(1~4℃)贮存。采用此法保存苹果茎尖1年，获得成功。③低压保存。是通过降低组培物周围的大气压力，以形成低压系统(』J玛)，可使与植物材料接触的所有气体分压均降低。采用此法时要求空气不断更换，以带走植物释放到贮藏空间中的有毒气体，要保持贮藏湿度为94%~%%，以防止保存物干缩和脱水。这种方法通过改进，有可能成为植物种质长期保存方法。此法多用于保存含有代谢活性物质的细胞系等。④低氧保存。

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