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1)  recombinant Taq DNA polymerase
重组TaqDNA聚合酶
1.
coli BL21 (DE3), and the recombinant Taq DNA polymerase was expressed by IPTG induction.
coliBL21(DE3),经IPTG诱导后,重组TaqDNA聚合酶在大肠杆菌中实现了大量表达。
2)  Taq DNA polymerase
TaqDNA聚合酶
1.
coli DH5α was transformed with p Taq expressing plasmid within which the Taq DNA polymerase gene was inserted.
用含有TaqDNA聚合酶基因的 pTaq表达质粒转化E 。
3)  Commercial Taq DNA polymerase
商品TaqDNA聚合酶
4)  recombinant Tgo DNA polymerase
重组TgoDNA聚合酶
5)  recombinant polymerase chain reaction
重组聚合酶链反应
6)  recombinant β-mannanase
重组甘露聚糖酶
补充资料:Taqdna聚合酶

taq dna聚合酶是从一种水生栖热菌(thermusaquaticus)yt1株分离提取的.yt是 一种嗜热真菌,能在70~75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离的。该酶基因全长2496个碱基,编码832个氨基酸,酶蛋白分子为 94kda.其比活性为200000单位/mg.75~80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷 酸,70℃延伸率大于60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒.温度过高(90℃以上) 或过低(22℃)都可影响taq dna聚合酶的活性,该酶虽然在90℃以上几乎无dna合成, 但确有良好的热稳定性,在pcr循环的高温条件下仍能保持较高的活性.在92.5℃、95℃ 、97.5℃时,pcr混合物中的taq dna聚合酶分别经130min,40min和5~6min后,仍可 保持50%的活性,实验表明.pcr反应时变性温度为95℃~20sec,50个循环后,taq dna聚合酶仍有65%的活性.taq dna聚合酶的热稳定性是该酶用于pcr反应的前提条 件,也是pcr反应能迅速发展和广泛应用的原因.taq dna聚合酶还具有逆转录活性, 其作用于类似逆转录酶.此活性温度一般为65~68℃,有mn2+存在时,其逆转录活性 更高.

taqdna聚合酶是mg2+依赖性酶,该酶的催化活性对mg2+浓度非常敏感.以活性程度 很低的鲑鱼精子dna为模板,dntp的浓度为0.7~0.8mmol/l时,用不同浓度mg2+进行 pcr反应10min,测定结果为mgcl2浓度在2.0mmol/l时该酶催化活性最高,此浓度能最 大限度地激活taqdna聚合酶的活性,mg2+过高就抑制酶活性,当mgcl2浓度在 10mmol/l时可抑制40~50%的酶活性.由于mg2+能与dntp结合而影响pcr反应液中游离 的mg2+浓度,因而mgcl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整,优化浓度.一般反应 中mg2+浓度至少应比dntp总浓度高0.5~1.0mmol/l.适当浓度的kcl能使taq dna聚合 酶的催化活性提高50~60%,其最适浓度为50mmol/l,高于75mmol/l时明显抑制该酶 的活性.

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